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农杆菌介导HaBADH基因转化马铃薯的研究

农杆菌介导HaBADH基因转化马铃薯的研究

作     者:张丽 程永芳 巩檑 甘晓燕 聂峰杰 陈虞超 石磊 张国辉 李苗 颉瑞霞 宋玉霞 

作者机构:宁夏农林科学院农业生物技术研究中心银川750002 宁夏大学生命科学学院银川750003 宁夏农林科学院固原农科所固原756000 

基  金:宁夏回族自治区育种专项(2014NYY201) 宁夏回族自治区自然科学基金(NZ14210 NZ14269) 宁夏农林科学院先导资金项目(NKYJ-14-05 NKYJ-15-32 NKYG-15-06 NKYJ-15-36 NKYQ-14-07)共同资助 

出 版 物:《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期:2016年第14卷第6期

页      码:1462-1469页

摘      要:本研究以马铃薯(Solanum tuberosum L.)试管薯作为转化受体,利用农杆菌介导法将从梭梭中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因(HaBADH)转化马铃薯,采用正交试验设计优化了影响马铃薯转化的4个主要因子,建立了农杆菌介导的马铃薯高效转化体系,获得了转基因植株。研究结果表明,转化过程中,浸染时间15 min,菌液浓度OD600为1.0,筛选培养时卡那霉素浓度30 mg/L、品种为大西洋为最佳转化方案,抗性芽分化率最高达到了35.9%;4个因子中基因型对转化效率影响最大,菌液浓度的影响次之,卡那霉素浓度和浸染时间的影响最小。经PCR、RT-PCR及Southern blot检测,证明了HaBADH基因整合到马铃薯中,阳性转化率为45.3%。

主 题 词:马铃薯 转化 农杆菌 HaBADH基因 转基因植株 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录:

D O I:10.13271/j.mpb.014.001462

馆 藏 号:203174045...

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