人CyPA基因重组质粒pET30α(+)-CyPA的构建及鉴定

作     者：张慧珍 郝艳红 吴拥军 吴逸明 ZHANG Huizhen;HAO Yanhong;WU Yongjun;WU Yiming

作者机构：郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450001 郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室郑州450001 郑州大学公共卫生学院卫生化学教研室郑州450001 

基　　金：国家自然科学基金资助项目30571552 河南省自然科学基金资助项目0611044900 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2009年第44卷第2期

页      码：288-289页

摘      要：目的:构建人CyPA基因重组质粒pET30α(+)-CyPA。方法:根据CyPA基因设计引物,从人肺癌组织cDNA中扩增目的基因。pET30α(+)质粒、目的基因DNA经NdeI酶、XhoI酶双酶切,用DNA快速连接试剂盒连接得重组子pET30α(+)-CyPA。将重组子转化DH5α,经卡那霉素琼脂糖平板筛选,挑选阳性克隆进行PCR扩增并测序。结果与结论:快速PCR能从阳性克隆中扩增出目的DNA。将重组质粒测序,由起始密码ATG到终止密码TAG止,扩增得到的目的基因片段具有完整的阅读框;与人CyPA基因cDNA序列进行比较,同源性达到99.8%。重组质粒pET30α(+)-CyPA构建成功。

主 题 词：亲环素A 质粒 克隆 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-6825.2009.02.021

馆 藏 号：203177008...