基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建

作     者：王加峰 郑才敏 刘维 罗文龙 王慧 陈志强 郭涛 WANG Jia-Feng;ZHENG Cai-Min;LIU Wei;LUO Wen-Long;WANG Hui;CHEN Zhi-Qiang;GUO Tao

作者机构：华南农业大学国家植物航天育种工程技术研究中心广东广州510642 

基　　金：广东省公益研究与能力建设转型项目(20150209) 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A101) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-01-12)资助~~ 

出 版 物：《作物学报》 (Acta Agronomica Sinica)

年 卷 期：2016年第42卷第8期

页      码：1160-1167页

摘      要：利用CRISPR/Cas9技术对调控水稻产量千粒重基因TGW6定点编辑,获得了一套有重要育种价值的tgw6突变体。设计了分别由U3、U6a和U6b启动子驱动、长20 bp的guide RNA(g RNA)靶点以靶向编辑TGW6基因的外显子,首先将这3个靶点一起组装到p YLCRISPR/Cas9-MT(I)载体上,然后利用农杆菌介导侵染水稻材料H447(R819/玉针香//R819的BC3F6);提取T0代转基因植株的基因组DNA并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析。结果表明,T0代材料中tgw6的突变频率高达90%,其中纯合缺失突变率约占51%。对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分tgw6的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%)。不同类型tgw6突变体的成功创建不仅丰富了tgw6的变异类型,为水稻的高产稳产奠定了重要的材料基础,还证实了CRISPR/Cas9技术在水稻基因工程育种中高效、易操作的特点。

主 题 词：水稻 基因编辑 CRISPR/Cas9 TGW6 千粒重 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1006.2016.01160

馆 藏 号：203178231...