核因子NF-κB p65亚基TAD的克隆及表达

作     者：侯春丽 应大君 魏勇 HOU Chun-li;YING Da-jun;WEI Yong

作者机构：第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学室重庆400038 

基　　金：国家自然科学基金(30472027) 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2007年第29卷第1期

页      码：21-23页

摘      要：目的获得NF-κB p65亚基转录激活区域(transcription activation dom ain,TAD),构建真核表达载体并在内皮细胞中检测其表达。方法培养人脐静脉内皮细胞,提取总RNA,经RT-PCR得到p65 TAD基因片段,测序正确后插入带有绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1,构建表达载体pEGFP-N1-p65 TAD,然后转染内皮细胞,荧光显微镜下观察表达情况,同时用W estern b lot分析蛋白的表达。结果有效地扩增了p65 TAD 783 bp的目的基因片段。酶切结果表明所构建的含p65 TAD基因的质粒与设计相同。p65 TAD在脐静脉内皮细胞中得到了高效的表达。结论成功地构建了p65 TAD的真核表达载体并实现了在内皮细胞中的高效表达。

主 题 词：核转录因子NF-κB p65亚基转录激活区域 克隆 表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 100102[100102] 071007[071007] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-5404.2007.01.007

馆 藏 号：203178319...