葡萄穗霉中β-甘露聚糖酶基因在黑曲霉中的表达及酶学性质

作     者：杨家兴 王华明 路福平 Jiaxing Yang;Huaming Wang;Fuping Lu

作者机构：天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 

基　　金：天津市科技计划项目(14ZCZDSY00065)~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2016年第56卷第8期

页      码：1242-1255页

摘      要：【目的】以黑曲霉(Aspergillus niger)为宿主菌来表达葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)中的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)基因。【方法】通过对葡萄穗霉全基因组进行比对分析,获得编码β-甘露聚糖酶基因s16942和s331的序列信息,通过设计引物,PCR扩增得到基因s16942和s331,连接到载体pGm上,并转化到黑曲霉中,获得的转化子经过amdS二筛平板复筛,测序验证,得到高效表达此基因的工程菌株G1-pGm-s16942和G1-pGm-s331。【结果】SDS-PAGE检测结果显示,G1-pGm-s16942和G1-pGm-s331表达的蛋白分子量大小分别约为48 kDa和60 kDa,且阴性对照中没有此条带。粗酶液的酶学性质表明,G1-p Gm-s16942表达的β-甘露聚糖酶的最适反应温度为60°C,最适反应pH为7,粗酶液的酶活最高达521 U/mL;G1-p Gm-s331表达的β-甘露聚糖酶的最适反应温度为50°C,最适反应pH为7,粗酶液的酶活最高达84 U/mL。【结论】本研究首次将葡萄穗霉的β-甘露聚糖酶基因转化到黑曲霉中并成功表达,并且具有较高的活性。

主 题 词：β-甘露聚糖酶 葡萄穗霉 黑曲霉 遗传转化 重组蛋白表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13343/j.cnki.wsxb.20150490

馆 藏 号：203178670...