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黔产苦参ISSR-PCR反应体系正交优化研究

黔产苦参ISSR-PCR反应体系正交优化研究

作     者:金燕 龙庆德 常楚瑞 陆平祝 王晓丽 

作者机构:贵州医科大学贵州贵阳550004 

基  金:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项(黔科合ZY字3004号) 贵州省科技计划项目(黔科合重大专项字6009-2) 

出 版 物:《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期:2016年第44卷第16期

页      码:114-116页

摘      要:[目的]确定适合苦参稳定的ISSR-PCR反应体系。[方法]采用经典的CTAB法提取苦参新鲜幼嫩叶片DNA;针对Mg2+、d NTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶进行正交设计L_(16)(4~5),优化黔产苦参ISSR-PCR反应体系。[结果]最适ISSR-PCR反应体系为:模板DNA 90 ng、0.4μmol/L引物、2.0 mmol/L Mg^(2+)、TaqDNA聚合酶0.5 U、0.5 mmol/L d NTPs。[结论]建立的苦参ISSR-PCR反应体系,经过19份苦参样品检验,证明该体系稳定可靠,可用于苦参遗传多样性分析。

主 题 词:苦参 CTAB ISSR—PCR反应体系 正交设计 

学科分类:1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D O I:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.16.036

馆 藏 号:203179772...

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