弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达

作     者：李军建 张仁利 傅玉才 耿艺介 黄达娜 胡忠 LI Jun-jian;ZHANG Ren-li;FU Yu-cai;GENG Yi-jie;HUANG Da-na;HU Zhong

作者机构：汕头大学医学院寄生虫教研室汕头515063 深圳市疾病预防控制中心深圳518020 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2010年第10卷第10期

页      码：1153-1155,1172页

摘      要：目的 克隆和表达弓形虫微线体蛋白MIC3基因。方法 从弓形虫RH株分离总的RNA,反转成cDNA.根据MIC3基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫cDNA中扩增MIC3基因片段,插入pGEM-T载体,并转化大肠杆菌Top10,经PCR、双酶切、测序验证后,将MIC3基因片段定向亚克隆到载体pET-28a中构建原核表达重组质粒pET-28a-MIC3,重组子在*** BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出792bp大小的MIC3基因片段并诱导表达27 300 Mr的重组MIC3蛋白。结论 成功构建和表达了弓形虫pET-28a-MIC3重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究莫定了基础。

主 题 词：弓形虫 MIC3 PCR 基因克隆 原核表达 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号：203179815...