正交设计优化CYP2C19基因多态性PCR体系

作     者：赵冠人 刘震 冯端浩 ZHAO Guan-ren;LIU Zhen;FENG Duan-hao

作者机构：解放军309医院药剂科北京100091 

出 版 物：《解放军药学学报》 (Pharmaceutical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2011年第27卷第6期

页      码：480-483页

摘      要：目的建立通用的CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应体系,筛选出各反应因素的最佳水平,并确定最佳退火温度。方法采用正交设计L16(45)在4个水平5个因素(Taq酶、引物、Mg2+、dNTP和模板DNA)对CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应体系进行实验,两次结果分别用统计软件MINITAB进行分析,利用梯度PCR确定引物最佳退火温度。结果 CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应的最佳反应条件为25μl体系中包含:Mg2+(25 mmol/L)1.0μl、dNTPs(2.5 mmol/L)2.0μl、上游引物和下游引物(2.5μmol/L)各1.5μl、模板DNA约30 ng、10×PCR缓冲液2.5μl、Taq酶2 U、染料2.0μl,退火温度为55℃。结论建立了CYP2C19基因多态性检测方法的通用PCR反应条件。

主 题 词：正交设计 基因多态性 PCR体系 CYP2C19 

学科分类：1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100706[100706] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-9926.2011.06.03

馆 藏 号：203180458...