实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌

作     者：马桂芬 张蕴哲 付博宇 袁耀武 苑宁 王鑫 张伟 MA Gui-fen;ZHANG Yun-zhe;FU Bo-yu;YUAN Yao-wu;YUAN Ning;WANG Xin;ZHANG Wei

作者机构：河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北农业大学理工学院河北沧州061000 

基　　金：河北省自然科学基金项目(C2008000216) 

出 版 物：《食品研究与开发》 (Food Research and Development)

年 卷 期：2016年第37卷第11期

页      码：127-132页

摘      要：建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。

主 题 词：实时荧光LAMP LAMP 变形杆菌 检测 atpD基因 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.11.030

馆 藏 号：203180654...