自组装短肽K_2I_4K_2在PCR中提高Taq DNA聚合酶热稳定性

作     者：李萌萌 徐晓帆 陈振银 张慧楠 罗忠礼 LI Meng-meng;XU Xiao-fan;CHEN Zhen-yin;ZHANG Hui-nan;LUO Zhong-li

作者机构：重庆医科大学基础医学院分子与肿瘤研究中心重庆400016 

基　　金：国家自然科学基金(31540019) 重庆市科委自然科学基金(cstc2015jcyj BX0072) 重庆医科大学科研培育基金(自然科学类)(201417) 重庆医科大学基础医学院苗圃基金(JC201514) 四川省重点实验室抗生素及其相关研究实验室基金(ARRLKF14-01) 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2016年第36卷第7期

页      码：879-885页

摘      要：目的设计自组装短肽K_2I_4K_2作为新型表面活性剂来稳定Taq DNA聚合酶,探索其对Taq DNA聚合酶在高温下的半衰期以及对PCR扩增效率的影响,探讨其在PCR中应用的可行性。方法圆二色仪检测短肽K_2I_4K_2在不同理化条件下的二级结构;原子力显微镜检测其自组装形成的纳米结构特征;紫外可见光谱检测其对Taq酶在高温下半衰期的影响;普通PCR验证其在PCR中应用的可行性;RT-q PCR检测其对Taq酶扩增效率的影响。结果短肽K_2I_4K_2在盐离子溶液中能自组装形成纳米纤维结构,且在高温下拥有稳定的二级结构;短肽K_2I_4K_2使得Taq在95℃下的半衰期增加了约1.6倍;短肽K_2I_4K_2组装24 h后大大增加了Taq酶的扩增效率。结论短肽K_2I_4K_2较为显著地增加了Taq DNA聚合酶的热稳定性,能够很好地应用于PCR反应系统中。

主 题 词：自组装短肽 纳米纤 Taq酶半衰期 PCR扩增效率 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

核心收录：

D　O　I：10.16352/j.issn.1001-6325.2016.07.001

馆 藏 号：203181972...