毕赤酵母表达的猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白及其免疫原性分析

作     者：张莉 康雪燕 章振华 李永清 盖丽丽 姜世金 张培君 ZHANG Li;KANG Xue-yan;ZHANG Zhen-hua;LI Yong-qing;GAI Li-li;JIANG Shi-jin;ZHANG Pei-jun

作者机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室北京100097 山东农业大学动物医学院山东泰安271018 

基　　金：北京市科技新星计划资助项目(2007B044) 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2015年第30卷第6期

页      码：84-90页

摘      要：为了获得具有良好免疫活性的基因工程抗原蛋白,利用毕赤酵母真核表达系统,表达猪传染性胃肠炎(河北分离株)的纤突糖蛋白。根据Gen Bank TGEV S基因设计一对引物,经PCR扩增出长2.2 kb的目的基因S,将S基因亚克隆于p PIC9k载体,转化TOP10感受态,PCR、酶切鉴定阳性克隆,SalⅠ线性化重组穿梭质粒pPIC9k-S,然后电转GS115感受态,利用G418抗性进行多拷贝整合子初步筛选,提取基因组并做PCR鉴定,得到阳性菌株,经诱导发酵后,上清发酵液经SDS-PAGE电泳检测,显示获得分子量为82 kDa左右的目的蛋白,同时用Western-Blotting检测到一条特异的目的条带;用目的蛋白免疫小鼠,ELISA检测免疫S蛋白小鼠血清抗体效价为1∶100,表达蛋白具有免疫活性。

主 题 词：毕赤酵母 猪传染性胃肠炎病毒 纤突糖蛋白S基因 免疫原性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 071007[071007] 090401[090401] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.7668/hbnxb.2015.06.013

馆 藏 号：203182244...