乌司他丁对严重烧伤大鼠脾脏免疫功能的影响及机制

作     者：李俊聪 胡超 姚咏明 杨红明 Li Juncong;Hu Chao;Yao Yongming;Yang Hongming

作者机构：解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100048 解放军总医院第一附属医院创伤研究中心北京100048 

基　　金：国家自然科学基金(81372053) 

出 版 物：《中华烧伤杂志》 (Chinese Journal of Burns)

年 卷 期：2016年第32卷第5期

页      码：266-271页

摘      要：目的观察乌司他丁对严重烧伤大鼠脾脏CD4＋T淋巴细胞和CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞（Treg）免疫功能及外周血高迁移率族蛋白B1（HMGB1）含量的影响，并分析其可能机制。方法将96只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假伤组、单纯烧伤组和乌司他丁组，每组32只。假伤组大鼠背部浸入37℃温水中12S模拟致伤；单纯烧伤组、乌司他丁组大鼠背部浸入94℃热水中12S，造成30％TBSA Ⅲ度烫伤（以下称烧伤）。各组大鼠伤后即刻起腹腔注射生理盐水40mL／kg，乌司他丁组大鼠同时腹腔注射乌司他丁4×104U／kg，每隔12小时注射1次，持续至伤后72h。于伤后1、3、5、7d，每组各取8只大鼠采集腹主动脉血，采用ELISA法检测血清HMGB1含量，随即处死大鼠取脾脏组织，分选CD4＋CD25＋Treg和CD4＋T淋巴细胞。采用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋Treg中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）、叉头翼状螺旋转录因子p3（Foxp3）阳性表达率，采用ELISA法检测CD4＋CD25＋Treg培养上清液中IL-10含量；采用ELISA法检测CD4＋T淋巴细胞培养上清液中IL-2、IL-4和γ干扰素含量，采用酶标仪测定CD4＋T淋巴细胞增殖活性，各组各时相点样本数为8。对数据行析因设计方差分析和LSD检验。结果（1）与假伤组比较，单纯烧伤组大鼠伤后1～7d血清HMGB1含量明显增加（P值均小于0．01）。与单纯烧伤组比较，乌司他丁组大鼠伤后1～7d血清HMGB1含量明显减少（P值均小于0．01）。（2）与假伤组比较，单纯烧伤组大鼠伤后1～7d CD4＋CD25＋Treg中CTLA4、Foxp3阳性表达率及细胞培养上清液中IL-10含量明显升高或增加（P值均小于0．01），于伤后3d达最大值，分别为（65±10）％、（76±10）％、（28．2±4．4）pg／mL，此时假伤组大鼠该3项指标分别为（45±7）％、（46±7）％、（11．2±2．3）pg／mL。与单纯烧伤组比较，乌司他丁组大鼠伤后1～7d CD4＋ CD25＋Treg中CTLA4、Foxp3阳性表达率及细胞培养上清液中IL-10含量明显降低或减少（P〈0．05或P〈0．01），分别于伤后7、1、7d达最低值[（43±6）％、（50±8）％、（12．4±3．4）pg／mL]，此时单纯烧伤组大鼠该3项指标分别为（58±8）％、（71±9）％、（19．7±2．8）pg／mL。（3）与假伤组比较，单纯烧伤组大鼠伤后1～7d CD4＋T淋巴细胞培养上清液中IL-2和γ干扰素含量明显减少、IL4含量明显增加（P值均小于0．01）。与单纯烧伤组比较，乌司他丁组大鼠伤后1～7dCD4＋T淋巴细胞培养上清液中IL-2和1干扰索含量明显增加、IL-4含量明显减少（P〈0．05或P〈0．01）。（4）与假伤组比较，单纯烧伤组大鼠伤后1～7dCD4＋T淋巴细胞增殖活性明显减弱（P值均小于0．01）。与单纯烧伤组比较，乌司他丁组大鼠伤后1～7dCD4＋T淋巴细胞增殖活性明显增强（P值均小于0．01）。结论乌司他丁可减弱严重烧伤大鼠脾脏CD4＋CD25＋Treg介导的免疫抑制功能，改善脾脏CD4＋T淋巴细胞的分泌和增殖功能，原因可能为其抑制了体内HMGB1的大量释放。

主 题 词：烧伤 脓毒症 T淋巴细胞 高迁移率族蛋白B1 免疫功能障碍 乌司他丁 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.003

馆 藏 号：203182378...