凡纳滨对虾肠道上皮细胞微胞子虫PCR检测方法的建立与应用

作     者：雷燕 肖洋 张会军 王娟 张文文 卢刚 王雪鹏 LEI Yan;XIAO Yang;ZHANG Hui-jun;WANG Juan;ZHANG Wen-wen;LU Gang;WANG Xue-peng

作者机构：广州利洋水产科技股份有限公司广东广州510515 广州金水动物保健品有限公司广东广州510515 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 

基　　金：山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-19) 泰安市科技发展计划项目(201440774) 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室开放基金项目(J2013006) 

出 版 物：《广东海洋大学学报》 (Journal of Guangdong Ocean University)

年 卷 期：2016年第36卷第4期

页      码：50-54页

摘      要：根据Gen Bank中对虾肠道上皮细胞微胞子虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)的基因保守序列,设计一对特异性引物,通过优化PCR扩增条件,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)EHP的PCR方法。用该方法对EHP阳性虾进行PCR扩增,得到与实验设计相符的330 bp特异性扩增条带,而对白斑综合症病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、对虾杆状病毒(BP)、"棉花虾"微孢子虫、黏孢子虫的阳性虾,以及健康虾的扩增结果为阴性。测序比对发现,PCR产物序列与Gen Bank EHP基因序列的同源性为99.8%,表明该PCR方法检测结果准确。敏感性试验表明,该方法最低可检测出约100 fg的EHP质粒DNA。用该PCR方法检测广东、广西、江苏、山东、海南等地的755份临床样品,共检出阳性样品21份。该PCR方法可用于凡纳滨对虾EHP的快速检测。

主 题 词：凡纳滨对虾 肠道上皮细胞微胞子虫 PCR 检测 临床应用 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-9159.2016.04.009

馆 藏 号：203183741...