猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒的研制

作     者：余波 谭诗文 冉懋韬 徐景峨 史开志 杨丽娟 YU Bo;TAN Shi-wen;RAN Mao-tao;XU Jing-e;SHI Kai-zhi;YANG Li-juan

作者机构：贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 

基　　金：贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字3085) 贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目(黔科合院所创能4004) 中央补助地方科技基础条件专项基金(黔科条中补地4001) 贵州省农业科学院院专项(黔农科院院专项040) 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2013年第40卷第10期

页      码：152-154,180页

摘      要：根据GenBank中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7 N基因、猪乙型脑炎病毒(JEV)NS1基因序列,设计了2对引物,通过反应条件的优化,成功研制了检测PRRSV和JEV的双重一步法RT-PCR诊断试剂盒,扩增产物分别为245、504 bp。敏感性、特异性结果显示,该RT-PCR诊断试剂盒对2种病毒的最低核酸检测量分别为PRRSV 0.2 ng/L、JEV 0.4 ng/L,而对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒的扩增结果均为阴性。对52份疑似病猪样品的检测结果表明,该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒具有很好的特异性和敏感性,可用于临床猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎的检测。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪乙型脑炎病毒 双重一步法RT—PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-874X.2013.10.045

馆 藏 号：203186657...