半巢式荧光定量PCR快速检测登革Ⅰ型病毒成熟microRNA方法的建立

作     者：滕娟 潘林奇 李晓杰 何声梅 周文雄 陈莉 陈丽 TENG Juan;PAN Lin-qi;LI Xiao-jie;HE Shengmei;ZHOU Wen-xiong;CHEN Li;CHEN Li

作者机构：海南出入境检验检疫局海南海口570311 中山大学附属第三医院广东广州510000 

基　　金：国家质检总局科技计划项目(No.2014IK042) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2016年第11卷第6期

页      码：554-557页

摘      要：目的建立外周血中登革病毒微小RNA检测方法,探讨其作为登革热病毒感染生物标记物的可行性。方法设计并筛选半巢式实时荧光定量PCR检测登革病毒miRNA引物,验证方法的灵敏度、特异性和重复性。结果设计的登革病毒茎环引物和扩增引物可区分健康人和登革热Ⅰ型感染者;重复试验确定Ct≤35为登革病毒感染阳性,Ct〉35为阴性,同一样品内相对标准偏差（RSD）为0.05%,样品间的相对标准偏差（RSD）为0.15%,总体样品的相对标准偏差（RSD）为5%;该方法检测miRNA的灵敏度为1×10^（-7）μmol/L,检测1～10^（-4）μmol/L内的miRNA呈良好的线性关系。该方法也显示了较好的特异性。结论成功建立了半巢式SYBR GreenⅠ荧光定量qRT-PCR检测Ⅰ型DENV的miRNA方法。外周血中成熟的miRNA可以作为一种潜在的DENV感染生物标志物。

主 题 词：成熟miRNA 登革病毒Ⅰ型 半巢式 荧光定量PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13350/j.cjpb.160616

馆 藏 号：203187205...