猪核糖核酸酶L基因真核表达载体的构建与表达

作     者：周明明 王加才 姜宁朋 丛晓燕 陈蕾 吴家强 李俊 杜以军 王金宝 

作者机构：山东大学生命科学学院山东济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061 山东省科技服务发展推进中心山东济南250101 

基　　金：国家自然科学基金(31370189) 公益性行业(农业)科研专项(201303046) 中国博士后科学基金特别资助项目(2014T70645) 山东省自然科学杰出青年基金(JQ201411) 山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-06-022-06) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第48卷第8期

页      码：69-72页

摘      要：为了研究猪核糖核酸酶L(sRNase L)的抗病毒能力,利用pXJ41载体构建猪RNase L基因真核表达载体pXJ41-sRNase L,采用poly(I∶C)转染PK-15细胞刺激诱导sRNase L基因转录mRNA;根据Gen Bank上sRNase L基因编码区序列设计引物并加入真核表达增强序列Kozak序列,通过RT-PCR扩增sRNase L编码基因序列,并将其克隆至真核表达载体pXJ41,通过双酶切和测序鉴定重组质粒;将重组表达载体pXJ41-sRNase L转染Marc-145细胞,Western blot检测sRNase L在Marc-145细胞中表达。结果显示:成功扩增得到sRNase L基因全长;成功克隆至真核表达载体pXJ41并能够在Marc-145细胞中成功表达。结果表明:成功构建了真核表达载体pXJ41-sRNase L并在Marc-145细胞中实现了sRNase L的表达,为进一步研究sRNase L在猪体内先天性免疫中抗病毒能力及其机制提供了条件。

主 题 词：猪 核糖核酸酶L 抗病毒 先天性免疫 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203187621...