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荧光定量PCR方法快速检测人肠道病毒埃可30的研究

荧光定量PCR方法快速检测人肠道病毒埃可30的研究

作     者:易丽娜 郑焕英 肖红 曾汉日 陆靖 

作者机构:广东省疾病预防控制中心广东省公共卫生研究院广东广州511430 广东省疾病预防控制中心 

基  金:广东省科技计划项目(2014A020212243) 

出 版 物:《华南预防医学》 (South China Journal of Preventive Medicine)

年 卷 期:2016年第42卷第4期

页      码:386-389页

摘      要:目的建立特异、快速、灵敏的人肠道病毒埃可30(ECHO30)核酸检测的荧光定量PCR方法。方法应用Clustal W软件分析ECHO30基因序列,设计特异性引物和Taq Man探针,研制ECHO30病毒实时荧光定量PCR方法。与巢式PCR方法比较,确定方法的灵敏性,并利用数字PCR定量该方法的检测下限。同时通过对广东省内主要流行的其他肠道病毒株的检验,确定方法的特异性。结果本研究建立的方法能特异性扩增ECHO30核酸,与巢式PCR方法比较,灵敏度高,检测下限低至27.7 copies/μL;且与广东省内主要流行的其他肠道病毒株(肠道病毒71型和柯萨奇病毒A6、A10、A16)均无交叉反应。该方法无论对高浓度还是低浓度样本偏差均很小,具有很好的重复性。结论本研究建立的荧光定量PCR是一种能快速、灵敏、特异检测ECHO30的方法,适用于临床早期诊断。

主 题 词:人肠道病毒埃可30 荧光定量PCR TaqMan探针 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 1010[医学-医学技术类] 100401[100401] 10[医学] 

D O I:10.13217/j.scjpm.2016.0386

馆 藏 号:203187793...

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