梅花鹿超氧化歧化酶的克隆与原核表达

作     者：李仁宽 曾志森 林娟 叶秀云 LI Ren-kuan;ZENG Zhi-sen;LIN Juan;YE Xiu-yun

作者机构：福州大学生物科学与工程学院福建福州350002 酶高效表达国家工程实验室福建福州350002 

基　　金：国家自然科学基金项目("鹿茸促成骨细胞生长协同作用组分的分离鉴定及其分子作用机理研究" 20672021)资助 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2010年第20卷第4期

页      码：9-12页

摘      要：目的:利用分子生物学的方法克隆梅花鹿超氧化歧化酶(Cu,Zn-SOD)基因,并将其于大肠杆菌(***)中表达。方法:通过设计扩增引物及RT-PCR技术从梅花鹿肝细胞中克隆出Cu,Zn-SOD基因,将其构建于表达质粒pET21a(+)并转入*** Rosetta(DE3)。结果:通过IPTG诱导表达,在Rosetta(DE3)中成功表达出具Cu,Zn-SOD活性的梅花鹿超氧化物歧化酶,三角摇瓶发酵水平约257U/ml发酵液;经过纯化后得到比活3092U/mg的梅花鹿超氧化物歧化酶。结论:获得了梅花鹿的Cu/Zn-SOD基因的全序列,并使其得到表达,对研究鹿茸的功效和保护梅花鹿这一物种具有一定意义。

主 题 词：梅花鹿 超氧化物歧化酶 克隆 大肠杆菌 表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-311X.2010.04.112

馆 藏 号：203188073...