结缔组织生长因子小干扰RNA的构建及其干扰效果检测

作     者：李勤操 郑喜邦 王晓晖 杨智洪 姜艳超 丁丽华 李杰萍 叶棋浓 LI Qin-Cao;ZHENG Xi-Bang;WANG Xiao-Hui;YANG Zhi-Hon;JIANG Yan-Chao;DING Li-Hua;LI Jie-pin;YE Qi-Nong

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100850 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 

基　　金：国家自然科学基金项目(30370738 30500091 30530320) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2008年第19卷第3期

页      码：347-349页

摘      要：目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对CTGF基因表达的干扰效果。方法:根据CTGF基因序列,设计2条合理的CTGF-siRNA,并将其克隆到siRNA载体pSliencer2.1-U6 neo中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行酶切和测序鉴定;将构建成功的CTGF-siRNA重组质粒与带FLAG标签的CTGF表达载体共同转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测siRNA的干扰效果。结果:构建了2个CTGF-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的干扰效果可达75%以上。结论:构建的CTGF-siRNA可为进一步研究CTGF的功能提供参考。

主 题 词：结缔组织生长因子 小干扰RNA 表达载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2008.03.008

馆 藏 号：203188077...