干扰乳酸脱氢酶A表达对肝癌HepG2细胞增殖与迁移的影响

作     者：司素华 熊二梦 杜凤仪 彭琬昕 龚爱华 SI Su-hua XIONG Er-meng DU Feng-yi PENG Wan-xin GONG Ai-hua

作者机构：如皋市中医院检验科江苏如皋226500 江苏大学医学院江苏镇江212013 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2015年第25卷第6期

页      码：487-490页

摘      要：目的:观察靶向乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase-A,LDHA)的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肝癌Hep G2细胞系的干扰效率及其对细胞增殖与迁移的影响。方法:设计合成LDHA及对照e GFP shRNA序列,克隆至真核表达质粒p LKO.1-TRC,质粒抽提纯化后测序鉴定。重组质粒用脂质体转染肝癌细胞系,采用反转录(RT)-PCR和免疫印迹检测LDHA的表达,验证shRNA的干扰效率。采用CCK-8和克隆形成实验检测干扰LDHA后细胞增殖的变化,划痕实验检测干扰LDHA对细胞迁移的影响。结果:成功构建针对LDHA和对照e GFP的shRNA表达质粒。与转染sh-e GFP组相比,转染sh-LDHA组Hep G2细胞中LDHA mRNA和蛋白表达水平明显降低(P均<0.05)。与sh-e GFP组相比,sh-LDHA组72,96 h细胞增殖明显降低,克隆形成数减少,细胞迁移距离短(P均<0.05)。结论:LDHA的干扰质粒能有效干扰LDHA在肝癌Hep G2细胞中的表达,明显抑制Hep G2细胞的增殖活力和迁移能力。

主 题 词：肝细胞肝癌 乳酸脱氢酶A RNA干扰 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13312/j.issn.1671-7783.y150180

馆 藏 号：203188276...