siRNA干扰NF-кB家族成员表达抑制人肝癌HepG2细胞表达NKG2DLs

作     者：黄宇贤 陈心彤 蔡宋浩 龙慧 郭坤元 吴秉毅 宋朝阳 贺艳杰 李玉华 

作者机构：南方医科大学珠江医院血液科广东广州510282 纽约州立大学西奈山医学院伊坎基因组学与高维生物学研究所美国纽约10029 中山大学附属汕头医院血液科广东汕头525031 

基　　金：国家自然科学青年基金资助项目(No.81302372 81300431) 南方医科大学珠江医院优秀中青年人才项目资助(No.201207008) 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2015年第22卷第6期

页      码：696-702页

摘      要：目的:探讨舒尼替尼诱导人肝癌HepG2细胞表达的自然杀伤细胞2族成员D配体(natural killer group 2 member D ligands,NKG2DLs)与核因子kappa B(nuclear factor B kappa,NF-κB)信号通路之间的相互作用。方法:常规体外培养HepG2细胞,利用实时荧光定量PCR检测1μmol/L舒尼替尼处理HepG2细胞24 h前后NF-κB基因家族成员mRNA的表达情况,利用计算机辅助设计并合成NF-κB1、NF-κB2和Rel B siRNA引物,通过脂质体法将目的基因siRNA转染于HepG2细胞,荧光显微镜观察转染情况,实时荧光定量PCR检测干扰效率,Western blotting检测siRNA转染前后He G2细胞内NF-κB1、NF-κB2和Rel B蛋白表达,流式细胞术检测siRNA前后HepG2细胞NKG2DLs表达率。结果:实时荧光定量PCR结果显示,舒尼替尼处理HepG2细胞后,NF-κB1、NF-κB2和Rel B mRNA表达水平升高,主要以NF-κB2 mRNA和Rel B mRNA升高为主。荧光显微镜观测siRNA转染后HepG2细胞红色荧光表达率约为60%,干扰效率达95%以上。siRNA转染后HepG2细胞内NF-κB1、NF-κB2和Rel B蛋白表达水平明显下降,siRNA转染+药物组NKG2DLs表达率明显低于药物处理组(P<0.05)。结论:首次揭示了舒尼替尼通过NF-κB旁路途径诱导肿瘤细胞表达NKG2DLs。

主 题 词：舒尼替尼 肝细胞癌 干扰RNA HepG2细胞 NF-κB家族成员 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3872/j.issn.1007-385X.2015.06.004

馆 藏 号：203188439...