东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用

作     者：郑小龙 王群 孙涛 孙明君 张晓文 朱来华 梁成珠 ZHENG Xiao-long;WANG Qun;SUN Tao;SUN Ming-jun;ZHANG Xiao-wen;ZHU Lai-hua;LIANG Cheng-zhu

作者机构：山东出入境检验检疫局山东青岛266002 

基　　金：国家质检总局科技项目(2014IK240) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第38卷第8期

页      码：638-641页

摘      要：为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的PCR-DHPLC快速检测方法。结果显示该方法与其他6种常见马病病毒均无交叉反应,未检测到其他马病病毒的阳性吸收峰,具有较强的特异性;对梯度稀释的标准阳性模板的检测限可达到10拷贝/μL;利用本研究建立的方法与荧光定量RT-PCR对30份临床样品进行检测,两者符合率达100%。本研究建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可以用于EEE的病原学诊断及流行病学调查。

主 题 词：东方马脑脊髓炎 变性高效液相色谱 RT-PCR 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0425.2016.08.10

馆 藏 号：203188929...