串联表达大鼠心肌细胞Kir2·1shRNA载体的构建及其体外效应

作     者：雷印胜 张海洲 王来城 郭兰敏 范全心 邹承伟 李红昕 王安彪 LEI Yin-sheng;ZHANG Hai-zhou;WANG Lai-cheng;GUO Lan-min;FAN Quan-xin;ZOU Cheng-wei;LI Hong-xin;WANG An-biao

作者机构：山东大学山东省立医院心外科 山东大学山东省立医院中心实验室济南250021 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30471711) 

出 版 物：《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期：2005年第85卷第41期

页      码：2910-2915页

摘      要：目的构建串联表达5个针对大鼠kir2·1基因shRNA的真核表达载体,观察其对该基因表达的影响。方法选择5个针对大鼠kir2·1基因的RNA干扰位点,分别设计合成相应的5对寡核苷酸链,形成双链后分别连入带有U6启动子的相应载体,反复酶切连接将表达5个kir2·1shRNA的目的基因依次连接入载体pEGFP6-1,构建成串联真核表达载体pEGFP6-1Kir2·1,将其转染培养的大鼠心肌细胞,RT-PCR和Western印迹检测其对Kir2·1mRNA转录和蛋白表达的影响。结果成功构建串联表达5个大鼠Kir2·1基因shRNA的真核表达载体,该载体对大鼠心肌细胞Kir2·1mRNA转录的抑制率为83·5%,对心肌细胞Kir2·1蛋白表达的抑制率为68·1%。结论串联表达多个大鼠心肌细胞Kir2·1基因shRNA真核表达载体介导的RNA干扰可以特异性抑制该基因的表达,可能成为制造生物起搏器的一种新方法。

主 题 词：基因疗法 kir2.1基因 串联表达 RNA干扰 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:0376-2491.2005.41.008

馆 藏 号：203189030...