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ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

作     者:毕研丽 王金良 郭广君 吕素芳 杨慧 宋峰 苗立中 沈志强 

作者机构:山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 

基  金:山东省自主创新成果转化重大专项资助项目(2008ZHZX11103) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2012年第32卷第3期

页      码:341-344页

摘      要:根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒(ARV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术。结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。

主 题 词:三重聚合酶链反应 禽呼肠孤病毒 禽网状内皮增生病病毒 禽白血病病毒 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2012.03.007

馆 藏 号:203189146...

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