水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达

作     者：高利芬 刘鹏程 夏志辉 赵纪莹 史佳楠 江光怀 刘国振 翟文学 

作者机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101 江汉大学系统生物学研究院湖北武汉430056 河北农业大学生命科学学院河北保定071001 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(No.2014ZX08001-002) 国家自然科学基金(No.31300999) 江汉大学科研启动项目(No.3003-06000043)资助~~ 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2016年第32卷第9期

页      码：1255-1263页

摘      要：农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着对水稻白叶枯病的优良抗性。在此基础上,本研究对外源基因Xa21在CX8621中的整合和表达情况进行了分析。首先,通过在转化载体p BXa21的左右边界与Xa21基因序列设计嵌套引物,确定Xa21被完整地整合到CX8621中。随后,利用改良的Tail-PCR方法体外克隆了整合位点的边界序列,明确了Xa21被整合在CX8621的2号染色体上。然后,通过RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同时期和不同组织的表达情况,结果表明Xa21在CX8621中能稳定表达,其表达量的变化与之前报道的抗病性反应吻合。此外,还制备了天然XA21蛋白的抗体,对CX8621不同时期、不同组织中XA21蛋白的表达量进行了检测,结果发现在种子中检测不到XA21蛋白。由此,通过对外源基因Xa21的整合和表达分析,为CX8621的转基因生物安全评价提供了部分科学依据。

主 题 词：转基因水稻 Xa21 抗白叶枯病 T-DNA整合 表达分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13345/j.cjb.150549

馆 藏 号：203189860...