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多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

作     者:刘宁伟 邹大阳 董德荣 杨展 黄思妺 贺晓明 敖大 刘威 黄留玉 LIU Ning-wei;ZOU Da-yang;DONG De-rong;YANG Zhan;HUANG Si-mei;HE Xiao-ming;AO Da;LIU Wei;HUANG Liu-yu

作者机构:军事医学科学院疾病预防控制所北京100071 

基  金:国家重大传染病专项资助项目(2013ZX10004-203) 国家自然科学基金资助项目(81501836) 

出 版 物:《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期:2016年第40卷第9期

页      码:767-772页

摘      要:目的建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌(VPH)和单核细胞增生性李斯特菌(LM)的多重环介导等温扩增(mL AMP)方法。方法分别针对沙门菌bcfD基因、VPH的tlh基因和LM的iap基因设计mL AMP引物,以LAMP进行单重LAMP检测。实时浊度监测扩增结果,优化引物浓度配比,进而建立此3种食源性致病菌的mL AMP检测体系,以PCR检测灵敏性作为比较,进行特异性和灵敏性分析。结果实时浊度监测表明,该mL AMP体系具有良好特异性,可在45 min内一次性检测以上3种致病菌,且无非特异扩增产生。这3种菌的检测最低限分别为300 fg/μl、4.2 pg/μl和4.5 pg/μl,与PCR检测灵敏度相当。结论该多重LAMP可同时检测食品中的沙门菌、VPH和LM,可作为大规模样品的初筛或传统方法的辅助方法,用于快速判定样品中是否含有这3种致病菌。

主 题 词:多重LAMP 沙门菌 副溶血弧菌 单核细胞增生性李斯特菌 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.7644/j.issn.1674-9960.2016.09.018

馆 藏 号:203194492...

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