猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶的原核表达及活性检测

作     者：苑文涛 张亚宁 夏雨婷 李玉峰 YUAN Wentao ZHANG ~aning XIA Yuting LI Yufeng

作者机构：南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室江苏南京210095 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第48卷第10期

页      码：37-40页

摘      要：根据猪丹毒杆菌噬菌体基因测序结果,设计针对裂解酶(Ely)的特异性扩增引物,PCR扩增获得Ely产物,PCR产物经酶切后克隆入表达载体p ET-28a(+),获得重组质粒p ET-28a(+)-Ely,并转化至大肠杆菌BL21(Rosetta)中。以1mmol/L IPTG在28℃诱导8 h,SDSPAGE结果表明,蛋白在上清中高效表达;通过Ni2+-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,其纯度在90%以上;以100、10和1μg/m L的终浓度作用于猪丹毒杆菌培养物,每隔1 h进行一次菌落计数,直至7 h,结果表明该裂解酶在体外可以有效裂解猪丹毒杆菌,并呈一定的时间和剂量依赖性。该研究将为治疗耐药性猪丹毒杆菌感染提供新的思路。

主 题 词：猪丹毒杆菌 噬菌体 裂解酶 表达 活性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203194493...