SYBR green实时荧光定量PCR检测微小RNA21的方法建立及在食管鳞癌中的应用

作     者：马文静 李鲁 吕国栋 刘涛 郑树涛 霍奇 林仁勇 卢晓梅 MA Wen-jing;LI Lu;LV Guo-dong;LIU Tao;ZHENG Shu-tao;HUO Qi;LIN Reng-yong;LU Xiao-mei

作者机构：新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院检验科新疆乌鲁木齐830054 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30760223 30860097) 新疆高技术研究发展计划基金项目(XJKJT200511113) 新疆医科大学第一附属医院科研奖励基金项目(2008-YFY-01)资助 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2010年第20卷第1期

页      码：45-48页

摘      要：目的:建立SYBR green实时荧光定量PCR检测微小RNA miR-21的技术平台及应用。方法:设计微小RNA21和U6的的颈环结构反转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参利用SYBR green实时荧光定量PCR法检测小鼠各器官中的微小RNA21的含量。提取16例食管鳞癌患者的肿瘤组织及其近旁组织中的总RNA,检测其微小RNA21表达水平。结果:SYBR green实时荧光定量PCR检测U6和微小RNA21含量的熔解曲线单一,PCR产物特异。在Balb/c小鼠的4种器官中,肝脏、脾脏、肾脏分别为脑组织的8.71、5.38、3.47倍。16对食管鳞癌患者的样本中,14例微小RNA21的拷贝数高于其近旁组织约10.58倍(p<0.01)。结论:此研究成功建立了SYBR green荧光定量PCR法检测小鼠和人微小RNA-21含量的技术平台,为进一步阐述miR-21在食管鳞癌的发生中的作用提供了新方向。

主 题 词：SYBR green实时荧光定量PCR miR-21 微小RNA 食管鳞癌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2010.01.008

馆 藏 号：203194926...