Ad-siICOS阻断ICOS共刺激通路抑制大鼠角膜移植排斥反应的实验研究

作     者：袁伟 陆晓和 宫玉波 周瑾 YUAN Wei;LU Xiao-he;GONG Yu-bo;ZHOU Jin

作者机构：济南军区青岛第一疗养院体检科266071 南方医科大学珠江医院眼科 

基　　金：广东省科技计划项目(2006B36003008) 

出 版 物：《眼科》 (Ophthalmology in China)

年 卷 期：2011年第20卷第3期

页      码：161-164页

摘      要：目的观察携带报告基因GFP且表达ICOS-siRNA的重组腺病毒(Ad-siICOS-EGFP)阻断可诱导共刺激分子(in-ducible costimulator,ICOS)共刺激通路对角膜移植急性免疫排斥的抑制作用。设计实验性研究。研究对象Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠。方法取Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠,建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C、D4组,每组20只鼠:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;C组为Ad-EGFP注射组;D组为生理盐水注射组。术后每日在裂隙灯显微镜下观察角膜植片以及眼前段组织的变化。对角膜混浊、水肿、新生血管3项指标进行评分,观察排斥反应指数(RI)的变化并记录植片的存活时间。各移植组分别于术后5天随机取10只大鼠,麻醉处死后,取植片行免疫组织化学及RT-PCR检测。各组其余大鼠进行角膜植片存活时间统计。主要指标角膜植片平均存活时间I;COS蛋白表达情况I;COSmRNA表达情况。结果各组角膜植片平均存活时间:A组(9.800±0.632)天;B组(14.700±1.418)天;C组(10.000±1.054)天;D组(10.100±0.876)天(F=52.383,P=0.000)。ICOS蛋白表达情况:各组植片均可见ICOS蛋白阳性表达,各组植片组织ICOS蛋白免疫组化染色阳性细胞评分:A组(1.900±0.568);B组(1.100±0.316);C组(1.800±0.632);D组(1.900±0.568)(F=5.214,P=0.004)I。COSmRNA表达情况:各组大鼠植片组织ICOS的PCR产物凝胶电泳条带辉度值比值:A组(1.004±0.164);B组(0.621±0.096);C组(0.929±0.134);D组(0.918±0.120)(F=16.717,P=0.000)。结论 Ad-siICOS-EGFP可有效抑制大鼠植片组织ICOSmRNA及ICOS蛋白的表达,从而阻断ICOS共刺激通路;移植术后即刻受体鼠球结膜下注射Ad-siICOS-EGFP,可抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥反应,延长角膜植片存活时间。

主 题 词：角膜移植 RNA干扰 可诱导共刺激分子 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100212[100212] 10[医学] 

馆 藏 号：203195485...