弓形虫TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：陈千林 刘梦丽 许正茂 王振宝 曹政 赵扬扬 巴音查汗 CHEN Qian-lin;LIU Meng-li;XU Zheng-mao;WANG Zhen-bao;CAO Zheng;ZHAO Yang-yang;Bayinchahan

作者机构：新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心新疆伊宁835000 重庆澳龙生物制品有限公司重庆荣昌402460 

基　　金：新疆维吾尔自治区科技成果转化专项项目(201454129) 库尔勒市重点科技计划项目(2013051108) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第38卷第9期

页      码：725-728页

摘      要：为建立一种快速、敏感的弓形虫检测方法,本研究根据弓形虫GRA7基因保守序列设计特异性检测引物和TaqMan-MGB探针,建立了弓形虫荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法能特异地检测弓形虫DNA,而对新孢子虫、牛巴贝斯、马驽巴贝斯等虫DNA的检测均为阴性,具有良好的特异性;经3D数字PCR判定,其最低检测限为4.58拷贝/μL,灵敏度是常规PCR的1 000倍;重复性试验的组内、组间变异系数均小于5%;对62份疑似弓形虫感染流产的胎牛脑组织DNA进行检测,荧光定量PCR阳性检出率为24.19%(15/62),常规PCR为19.35%(12/62),阳性样品均包含于荧光定量PCR阳性样品中。本研究建立的荧光定量PCR检测方法可用于弓形虫病的早期诊断和日常监测,为监控弓形虫"带虫宿主"提供了良好的技术支持。

主 题 词：弓形虫 荧光定量PCR TaqMan—MGB探针 3D数字PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0425.2016.09.11

馆 藏 号：203195975...