鳗鲡疱疹病毒ORF95基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作     者：李友娟 葛均青 宋铁英 林天龙 LI You-juan;GE Jun-qing;SONG Tie-ying;LIN Tian-long

作者机构：福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建农林大学动物科学学院福建福州350002 

基　　金：国家自然科学基金项目(31101933) 福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2009R10035-6) 福建省科技平台建设项目(2009N2003) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第27卷第8期

页      码：787-791页

摘      要：鳗鲡疱疹病毒(Anguillae herpesvirus,AngHV)是淡水鳗鲡的主要病毒性疾病病原之一。根据鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)的基因组序列(GenBank:NC-013668)设计引物,扩增鳗鲡疱疹病毒福建株(AngHV-FJ)ORF95基因的开放阅读框序列,克隆至pMD19-T载体;经限制性内切酶酶切和测序鉴定,进一步将其克隆至原核表达载体pET-32a,构建了表达质粒32a-ORF95,将其转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了ORF95在大肠杆菌中的高效表达。在0.1mmol.L-1 IPTG、23℃诱导14h的条件下,可溶性ORF95蛋白的表达量较高,经镍柱纯化获得了高纯度的融合蛋白。

主 题 词：鳗鲡疱疹病毒 ORF95 基因克隆 原核表达 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0384.2012.08.001

馆 藏 号：203196227...