基于16S rRNA基因的不同血清型鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法的建立

作     者：谭秋杉 高利荣 王晓杜 蒋昭君 沈蔷 张先福 TAN Qiu-shan;GAO Li-rong;WANG Xiao-du;JIANG Zhao-jun;SHEN Qiang;ZHANG Xian-fu

作者机构：浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地浙江临安311300 浙江农林大学动物科技学院浙江临安311300 

基　　金：国家自然科学基金(31372501) 浙江省自然科学基金(LY13C180001) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第36卷第1期

页      码：50-53页

摘      要：为建立一种快速诊断鸭疫里默氏杆菌(RA)病的方法,本研究根据NCBI登录的ATCC 11845菌株(CP003388.1)的16S rRNA基因保守序列设计引物,对标准株和疑似感染RA的病料样品进行检测,建立RA PCR检测方法。结果显示,6株RA标准株(包括1、2、10和11血清型)和2个疑似RA感染的病料样品,均能够扩增出698 bp的特异性片段,而鸭大肠杆菌和鸭沙门氏菌扩增均呈阴性。测序分析表明,疑似病料样品中扩增的片段与ATCC 11845菌株相应片段同源性达99.9%。PCR敏感性试验检测显示,其最小检出量为2.3×103cfu/mL;应用该法对10只RA病鸭的组织样品检测显示,脑组织检出率最高,其次为心血、肝脏和脾,而肠和肌肉呈阴性。同时,PCR法对RA的检出率比细菌分离鉴定法高11.7%。本研究建立的基于16S rRNA基因序列的PCR检测方法,能够检测主要流行于浙江地区的4种血清型RA,具有特异、灵敏和快速的优点。

主 题 词：16S rRNA 鸭疫里默氏杆菌 PCR检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2014.01.13

馆 藏 号：203196712...