逆转录环介导等温扩增技术快速检测大豆花叶病毒

作     者：张雯娜 李晋玉 田金艳 卫其巍 智海剑 陶小荣 ZHANG Wen-na;LI Jin-yu;TIAN Jin-yan;WEI Qi-wei;ZHI Hai-jian;TAO Xiao-rong

作者机构：南京农业大学植物保护学院江苏南京210095 南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095 

基　　金：国家高技术研究发展计划“863计划”(2012AA101501) 公益性行业(农业)科研专项(201303028) 教育部高校博士点基金(20130097110004) 江苏省基础研究计划(自然科学基金)(BK2012769) 

出 版 物：《大豆科学》 (Soybean Science)

年 卷 期：2014年第33卷第3期

页      码：422-428页

摘      要：大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus，SMV）是一种在世界很多国家广泛分布并极具破坏性的植物病毒，导致大豆严重减产和种质衰退，每年都会给很多国家带来巨大的农业经济损失，为此，建立了一种逆转录环介导等温扩增（ Reverse-transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP）全新的SMV检测技术，利用该技术可以快速、准确与有效地检测大豆植株和种子中携带的SMV。根据GenBank数据库中大豆花叶病毒的外壳蛋白基因序列，设计并筛选到了SMV RT—LAMP特异性引物组，应用该引物组优化了RT—LAMP反应参数，灵敏度实验结果表明，RT-LAMP检测SMV比普通RT—PCR灵敏度高10～100倍。结合RNA粗提法，建立了一步法RT—LAMP快速、灵敏地检测到植物叶片中的SMV。加入荧光染料SYBR Green Ⅰ则可在反应管中直接观察检测结果，实现了检测的可视化。该RT-LAMP技术还可灵敏地检测到大豆种子中携带的SMV。RT-LAMP检测方法第一次应用于SMV的检测，具有灵敏度高、速度快和特异性强的优点，可应用于实验室和田间大豆样品SMV的快速检测。

主 题 词：大豆花叶病毒 快速检测 RT—LAMP 大豆 种子带毒检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录：

D　O　I：10.11861/j.issn.1000-9841.2014.03.0422

馆 藏 号：203196919...