中国旱獭IL-10分子的克隆和序列分析

作     者：李安意 王宝菊 田拥军 江敏 鲍俊杰 郝友华 喻植群 陆蒙吉 杨东亮 LI An-yi;WANG Bao-ju;TIAN Yong-jun;JIANG Min;BAO Jun-jie;HAO You-hua;YU Zhi-qun;LU Meng-ji;YANG Dong-liang

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室 华中科技大学同济医学院病原生物学系武汉市430030 

基　　金：国家自然科学基金(No.30271170) 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2006年第3卷第5期

页      码：344-346页

摘      要：目的克隆旱獭白细胞介素-10(IL-10)全长cDNA序列进行序列分析,为IL-10分子的表达和在土拨鼠肝炎病毒(woodchuckhepatitisvirus,WHV)感染中的应用奠定基础。方法根据Genbank的土拨鼠IL-10cDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取旱獭脾组织总RNA作为模板,RT-PCR扩增旱獭IL-10cDNA。PCR产物纯化后连接至T载体(pMD18-T),构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10。对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序。对所获得的序列应用分析软件进行分析。结果RT-PCR扩增产物为685bp。重组质粒pMD18-T-cmIL-10经EcoRⅠ与PstⅠ双酶切提示含目的基因片段。序列分析提示旱獭IL-10的编码序列为537bp,与土拨鼠IL-10的同源性为100%。结论成功克隆旱獭IL-10分子,并构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10。

主 题 词：中国旱獭 白细胞介素-10 序列分析 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-8009.2006.05.004

馆 藏 号：203202110...