羊痘病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

作     者：黄鹤 李应国 肖进文 聂福平 王昱 刘力 HUANG He;LI Ying-guo;XIAO Jin-wen;NIE Fu-ping;WANG Yu;LIU Li

作者机构：西南大学动物科技学院重庆400715 重庆市进出口食品安全工程中心重庆400020 

基　　金：质检总局科研专项(2010IK015) 质检总局科研专项(2009IK027) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第39卷第6期

页      码：72-75页

摘      要：为建立羊痘病毒(CaPV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中羊痘病毒的保守基因序列,设计出针对羊痘病毒的LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320仪优化得到病毒核酸等温扩增最佳条件是62℃恒温反应60min。在此条件下,病毒核酸的最低检测含量为3.1×10-2 pg/μL,灵敏度比OIE推荐的PCR方法高104倍。添加钙黄绿素(calcein)建立的目测法,还可实现对上述病原体检测结果肉眼观察。本研究获得的CaPV LAMP仪器法和目测法可特异性地扩增羊痘病毒属的山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒核酸,具有反应快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、设备要求低等特点。

主 题 词：羊痘病毒 山羊痘病毒 绵羊痘病毒 牛疙瘩皮肤病病毒 LAMP 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-7236.2012.06.017

馆 藏 号：203202111...