人细胞外基质磷酸糖蛋白MEPE的表达纯化及抗体制备

作     者：马祖兴 高宁 绳纪坡 于芳 林宇翔 罗维 柯波 胡宝成 MA Zu-xing;GAO Ning;SHENG Ji-po;YU Fang;LIN Yu-xiang;LUO Wei;KE Bo;HU Bao-cheng

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100850 福建农林大学生命科学学院福州350002 

基　　金：国家自然科学基金项目(31070760 30770651 30670616) 国家重点基础研究发展计划项目(2007CB914604) 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2011年第35卷第1期

页      码：39-43页

摘      要：目的原核表达、纯化人细胞外基质磷酸糖蛋白(Mepe)基因,并制备多克隆抗体。方法设计出扩增人Mepe全长基因的特异引物,通过PCR扩增出该基因片段,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性。结果原核表达了人Mepe全长基因,纯化了MEPE蛋白,并获得了抗MEPE的多克隆抗体,抗体效价达到1∶25 600,Western印迹结果显示,该抗血清能够特异识别原核及真核细胞表达的MEPE蛋白。结论 MEPE蛋白能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究MEPE的功能奠定了基础。

主 题 词：细胞外基质磷酸糖蛋白 表达纯化 多克隆抗体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2011.01.010

馆 藏 号：203202556...