牛流行热病毒LUX^(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立

作     者：刘志玲 陈茹 邱索平 马静云 曾碧健 周科 Liu Zhiling;Chen Ru;Qiu Suoping;Ma Jingyun;Zeng Bijian;Zhou Ke

作者机构：广东出入境检验检疫局广州510623 华南农业大学动物科学院广州510642 

基　　金：国家质检总局科研项目(2006IK-019) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2010年第26卷第8期

页      码：174-179页

摘      要：采用LUXTM荧光PCR技术原理,以牛流行热病毒(BEFV)糖蛋白抗原G基因保守序列为模板设计特异荧光PCR扩增引物,建立BEFV LUXTM实时荧光RT-PCR快速检测方法。试验结果显示,所建立的荧光RT-PCR可特异检测牛流行热病毒RNA,而对蓝舌病病毒、牛病毒性腹泻-粘膜病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、牛白血病病毒以及与BEFV同种属的狂犬病病毒核酸检测呈阴性反应。敏感性试验表明LUXTM荧光RT-PCR对BEFV RNA的检测敏感性比常规RT-PCR方法提高达100倍以上。该LUXTM荧光RT-PCR的批内检测变异系数0.64%-1.17%,批间检测变异系数均小于2%,表明检测体系稳定、重复性好。通过人工添加灭活病毒液的方法制备30份模拟感染牛血清样品,采用上述所建立的BEFV LUXTM荧光RT-PCR方法检测均呈阳性。

主 题 词：牛流行热病毒 LUXTM荧光引物 实时荧光RT-PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.08.033

馆 藏 号：203203403...