双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分

作     者：汪永信 安虹 程坚 程潇 刘娟娟 张波 Wang Yongxin;An Hong;Cheng Jian;Cheng Xiao;Liu Juanjuan;Zhang Bo

作者机构：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心合肥230051 

基　　金：安徽省科技计划项目(11010402143) 安徽省质监局科研项目(皖质函【2010】171号) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2012年第28卷第1期

页      码：134-138页

摘      要：根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、兔、驴、鹿、狗、马、鸽子、大豆、玉米、小麦、大米、马铃薯及番茄的线粒体DNA作为模板进行特异性试验,结果表明该方法仅能特异性扩增鸡源性成分,而对其它物种未见有效扩增。通过灵敏度测试,该方法检出限达0.01%。所制定的方法特异性高,灵敏度好,可以作为食品和饲料中鸡源性成分的高效检测方法。

主 题 词：双重实时荧光PCR 细胞色素b基因 鸡源性成分 内参照 检测方法 

学科分类：090502[090502] 0905[农学-林学类] 09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.01.020

馆 藏 号：203203403...