薰衣草高质量DNA提取及ISSR-PCR多重化体系的建立

作     者：权俊萍 贾晓鹰 戴丽娜 肖俊辉 田琴 牛攀新 吕国华 Quan Junping;Jia Xiaoying;Dai Lina;Xiao Junhui;Tian Qin;Niu Panxin;Lü Guohua

作者机构：石河子大学农学院石河子832000 石河子大学设施生物种苗研发中心石河子832000 

基　　金：石河子大学动植物育种专项(gxjs2009-yz03) 石河子大学高层次人才引进项目(RCZX200819) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2012年第28卷第5期

页      码：151-157页

摘      要：以伊犁薰衣草‘701’新鲜叶片为材料,对4种基因组DNA提取方法进行比较,并通过单因子梯度比较试验结合L9(34)正交优化设计,对ISSR-PCR扩增体系中退火温度、DNA、Mg2+、dNTP和引物浓度进行最佳条件及配比筛选。结果表明,改良3×CTAB法是薰衣草高质量DNA少量提取的最佳方法 ;建立薰衣草ISSR-PCR扩增优化体系为,20μL反应体系中包括模板DNA 50 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.3 mmol/L,Taq酶1 U;扩增程序退火温度为56℃。运用本试验建立的ISSR-PCR优化体系,对5份薰衣草种质进行了初步验证,获得了良好的多样性扩增条带。

主 题 词：薰衣草 DNA提取 ISSR-PCR 正交设计 体系优化 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.05.005

馆 藏 号：203203403...