维甲酸受体β基因RNAi表达质粒的构建及其对A549细胞增殖和分化的影响

作     者：林婵 王力 边六交 LIN Chan;WANG Li;BIAN Liu-Jiao

作者机构：西北大学基因工程中心陕西西安710069 中国科学院上海生命科学院研发中心上海200233 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2008年第19卷第3期

页      码：344-346页

摘      要：目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对维甲酸受体(RAR)β基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,诱导RARβ基因沉默,并观察其对肺癌细胞A549株的细胞周期和增殖的影响。方法:依据设计siRNA的原则,针对人RARβ的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆到pSUPER-NEO-GFP真核表达载体中构建重组体pSUPER-RARβ,转染至A549细胞中,以空质粒和RARβ高表达质粒转染为对照,用Western印迹检测RARβ基因的表达,并采用MTT试验检测转染后细胞株的增殖和细胞分化情况。结果:表达人类RARβ基因的siRNA重组表达质粒构建成功;MTT试验结果表明,转染的A549-RARβ-si细胞增殖能力降低。结论:采用RNAi技术特异阻断RARβ基因表达,通过转染A549细胞,可使其细胞形态发生变化,并抑制其细胞生长。

主 题 词：维甲酸受体β RNA干扰 A549细胞 基因表达抑制 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071009[071009] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2008.03.007

馆 藏 号：203203406...