多重PCR方法检测锦鲤疱疹病毒基因

作     者：乌日琴 陈芳 张艺宜 刘芸莉 刘中勇 林志雄 

作者机构：广东出入境检验检疫局技术中心广东广州510623 华南农业大学动物科学系广东广州510642 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技项目(国检科2007IK014)资助 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2011年第28卷第11期

页      码：39-43页

摘      要：根据对已报道的PCR检测方法灵敏性评价,以常用KHV病毒PCR检测的目的基因KHVSphI片段(AY568590)、KHV5/9(AF411803)和KHVTK基因(AJ535112)作为靶基因,设计并选择3对特异性引物建立的多重PCR检测体系用于KHV病毒多基因的检测。本研究建立的多重PCR体系具有较高的特异性,能够特异性扩增出KHVSphI片段290bp、KHV5/9片段484bp和KHVTK基因片段409bp,对锦鲤和鲤鱼的另外一种病毒性病原鲤春毒血症病毒检测结果为阴性。多重KHV病毒PCR体系检测KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段单一模板的检测下限分别为:10fg、100fg和100fg,在相同模板浓度的情况下,KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段同时被检出的检测下限为100fg。对KHV病毒感染组织的检测结果表明,多重KHV病毒PCR检测结果与常规PCR检测结果基本吻合,在多重PCR检测体系中KHVTK基因片段检测的灵敏度高于检验检疫行业标准方法。结果表明,多重KHV病毒PCR检测方法能够快速、准确和灵敏地检测KHV病毒基因。

主 题 词：检测 锦鲤疱疹病毒 多重PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2011.11.020

馆 藏 号：203204234...