靶向hTERT人工miRNA表达框架的构建及其对HepG2细胞端粒酶活性的抑制作用

作     者：徐慧 龚霞 赵丹丹 范张玲 彭剑雄 XU Hui;GONG Xia;ZHAO Dandan;FAN Zhangling;PENG Jianxiong

作者机构：中南大学湘雅医学院医学检验系湖南长沙410013 

基　　金：中南大学本科生自由探索计划项目资助(2282014bks193) 

出 版 物：《中国普通外科杂志》 (China Journal of General Surgery)

年 卷 期：2014年第23卷第12期

页      码：1647-1651页

摘      要：目的:构建针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架,并验证其对Hep G2细胞端粒酶活性的抑制作用。方法:应用融合PCR技术针对不同位点设计并构建3个靶向h TERT的人工mi RNA表达框架,对各表达框架鉴定后,将其单独或两种共转染Hep G2细胞,采用TRAP-银染法和TRAP-二聚体蝎形探针荧光定量PCR法检测细胞端粒酶活性。结果:3个针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架均成功构建,单独或共转染Hep G2细胞后,Hep G2细胞的端粒酶活性均被不同程度的抑制,且两种表达框架共转染的抑制作用明显大于单独转染,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:靶向h TERT基因的人工mi RNA表达框架能有效而特异抑制Hep G2细胞端粒酶活性,多位点联合抑制是一种有效的实验方案。

主 题 词：端粒,末端转移酶 RNA干扰 细胞系,肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.7659/j.issn.1005-6947.2014.12.009

馆 藏 号：203204445...