应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒

作     者：花群义 金宁一 周晓黎 董俊 杨云庆 徐自忠 HUA Qun-yi;JIN Ning-yi;ZHOU Xiao-li;DONG Jiu;YANG Yun-qin;XU Zi-zhong

作者机构：云南出入境检验检疫局技术中心云南昆明650228 解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春130062 

基　　金：国家"十五"重大科技攻关项目(2001BA804A22) 云南省计委科技攻关重点项目((98)636 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2005年第25卷第2期

页      码：116-119页

摘      要：按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L 的引物浓度和 2 0 0 nmol/ L 探针浓度 ,获得的 CT值较小 ,而 ΔRn最大 ;可检测到相当于 0 .1 TCID50 的病毒 RNA;与 VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应 ;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系 ,且线性范围宽 ,相关系数为 0 .984 ;组内和组间试验重复性的变异系数 (CV)分别为 5 .4 %和 6 .7% ;与常规 RT- PCR相比较 ,该方法具有快速、特异、敏感、可定量 。

主 题 词：口蹄疫病毒 荧光定量RT-PCR 实时检测 口蹄疫 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4545.2005.02.002

馆 藏 号：203204478...