犬α-干扰素蛋白在不同表达载体中的生物学活性比较

作     者：刘欢 金红岩 侯强 史秋梅 董瑞凯 张通明 侯绍华 沈萍 LIU Huan;JIN Hong-yan;HOU Qiang;SHI Qiu-mei;DONG Rui-kai;ZHANG Tong-ming;HOU Shao-hua;SHEN Ping

作者机构：河北科技师范学院预防兽医实验室秦皇岛066003 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 

基　　金：公益性行业(农业)项目"宠物疫病快速诊断与疫苗研究与示范"(201303042) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第43卷第10期

页      码：2560-2565页

摘      要：根据GenBank中公布的犬α-干扰素(CaIFN-α)基因核酸序列,去掉信号肽后设计并合成1对引物,引入EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点。以提取的犬肝脏DNA为模板,利用PCR技术扩增CaIFN-α基因,并分别克隆至表达载体pBV220、pET-32a(His标签)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)原核表达系统。重组融合蛋白经SDS-PAGE及Western blotting鉴定。纯化目的蛋白,并采用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。试验结果表明,与pBV220载体连接的目的基因表达的蛋白活性较低,而与pET-32a(His标签)连接的目的基因表达的蛋白活性较高,达2.56×106 U/mL。通过分析不同载体对IFN-α的表达情况,为生产高活性的IFN奠定基础。

主 题 词：犬 α-干扰素 原核表达 生物学活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.10.008

馆 藏 号：203206972...