以原核表达的猪δ冠状病毒N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法的建立

作     者：张帆帆 宋德平 郭楠楠 叶昱 周信荣 李安琪 张敏 彭棋 陈燕君 黄冬艳 唐玉新 

作者机构：江西农业大学动物科学技术学院江西南昌330045 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31372457) 江西省科技厅落地计划项目(KJLD13029) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第38卷第10期

页      码：795-799页

摘      要：为建立检测血清中猪δ冠状病毒(PDCoV)抗体的间接ELISA方法,本研究根据PDCoV的N基因序列设计特异性引物,扩增出N蛋白全基因序列,将其克隆至低温表达载体p Cold I中并转入BL21,诱导表达获得大小约为41 ku的可溶性目的蛋白;western blot试验表明所表达的蛋白具有反应活性。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立了PDCoV间接ELISA抗体检测方法。结果表明,本研究建立的ELISA方法阴阳性临界值为0.316,与猪流行性腹泻病毒等6种猪常见病原阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,重复性和稳定性均较好。应用建立的间接ELISA方法,对收集自江西各地区282份猪血清进行检测,阳性率为12.8%(36/282),表明PDCoV在我省猪群中普遍存在。本实验建立的PDCoV抗体捕获间接ELISA为临床上猪群PDCoV感染监测和流行病学调查提供了实验依据。

主 题 词：猪δ冠状病毒 N蛋白 原核表达 间接ELISA 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0425.2016.10.08

馆 藏 号：203207190...