RNA干扰技术沉默上皮型钙黏蛋白表达对体外培养的喉癌Hep-2细胞增殖的影响

作     者：孙静 田军 陈琪 吴桂卿 SUN Jing;TIAN Jun;CHEN Qi;WU Guiqing

作者机构：青岛市市立医院耳鼻咽喉科山东青岛266000 潍坊市人民医院耳鼻咽喉科山东潍坊261000 枣庄市市立医院耳鼻咽喉科山东枣庄277000 赣南医学院第一附属医院耳鼻咽喉科江西赣南341099 

出 版 物：《中国耳鼻咽喉头颈外科》 (Chinese Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery)

年 卷 期：2016年第23卷第9期

页      码：507-510,514页

摘      要：目的通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默喉癌HeP-2细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,探讨E-cadherin对Hep-2细胞增殖能力的影响。方法设计、合成特异性小干扰RNA(siRNA)和无基因沉默功能的阴性siRNA转染Hep-2细胞,获得下调E-cadherin基因表达的体外培养的Hep-2细胞;荧光定量PCR检测E-cadherin基因的沉默效果;体外细胞增殖实验(MTT)检测Hep-2细胞体外增殖能力的变化。结果①重组质粒和脂质体质量体积按1:1转染时,转染效率最高组siRNA-3达65%。②荧光定量PCR:重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-siRNA1、pRNAT-U6.1/Neo-siRNA2、pRNAT-U6.1/Neo-siRNA3使E-cadherin mRNA的表达下调。以空白对照组为基准(设为1),E-cadherin相对于β-actin的改变倍数siRNA-1组=0.00092,siRNA-2组=0.00143,siRNA-3组=0.00045,阴性对照组=3.44898,差异有统计学意义。③MTT:经特异性siRNA处理的Hep-2细胞生长速度较对照组增快,差异有统计学意义。结论有效抑制Hep-2细胞E-cadherin mRNA的表达使Hep-2细胞的增殖能力增强。

主 题 词：RNA干扰 细胞增殖 喉肿瘤 钙粘蛋白 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.16066/j.1672-7002.2016.09.004

馆 藏 号：203207482...