小白杏自交不亲和S-RNase基因RNAi表达载体的构建及遗传转化

作     者：刘小芳 冯建荣 刘海楠 罗明 郭明星 谢晓婷 LIU Xiaofang;FENG Jianrong;LIU Hainan;LUO Ming;GUO Mingxing;XIE Xiaoting

作者机构：石河子大学农学院特色果蔬栽培生理与种质资源利用兵团重点实验室新疆石河子832003 西南大学生物技术中心农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室重庆北碚400715 

基　　金：国家自然科学基金项目(31272129) 

出 版 物：《石河子大学学报（自然科学版）》 (Journal of Shihezi University(Natural Science))

年 卷 期：2016年第34卷第4期

页      码：409-414页

摘      要：为了应用RNAi技术调控杏自交不亲和性状,根据自交不亲和S66-RNase基因序列(Gen Bank登录中)设计特异引物,通过RT-PCR扩增S66-RNase基因(Gen Bank登录中)高变区及下游(63 bp)作为靶基因,构建RNAi表达载体的ihp RNA。以植物表达载体p CAMBIA为骨架载体,利用农杆菌介导的方法转化本氏烟,利用子房转化法转化小白杏。结果显示:获得了长度为439 bp的ihp RNA。表达载体酶切检验表明S66-RNase基因的RNAi表达载体构建和转入农杆菌LBA4404成功。通过抗性筛选和GUS染色检测,获得了16株阳性植株。结论:获得转基因烟草植株证明了本研究构建的RNAi植物表达载体有效,为诱导杏S-RNase基因转录后基因沉默、获得自交亲和的杏提供参考。

主 题 词：杏 S-RNase基因 ihpRNA RNAi表达载体 烟草 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2016.04.003

馆 藏 号：203207685...