靶向沉默RNF2基因对食管癌细胞放射敏感度的影响

作     者：杨兴肖 李幼梅 刘志坤 马鸣 祝淑钗 YANG Xingxiao;LI Youmei;LIU Zhikun;MA Ming;ZHU Shuchai

作者机构：河北医科大学第四医院感染管理科石家庄050011 河北医科大学第四医院放疗科石家庄050011 河北医科大学第四医院检验科石家庄050011 

基　　金：国家自然科学基金(81372416) 河北省医学科学研究重点课题(20160183 20150305) 河北省中医药管理局指令性课题(NO:2015131) 

出 版 物：《肿瘤防治研究》 (Cancer Research on Prevention and Treatment)

年 卷 期：2016年第43卷第10期

页      码：829-834页

摘      要：目的探讨RNF2基因表达对X射线照射后食管癌细胞放射敏感度的影响。方法针对RNF2mRNA序列,设计合成3对有效的干扰序列(siRNA1、siRNA2和siRNA3)和阴性对照序列。瞬时转染细胞,分别命名为RNF2 siRNA1组、RNF2 siRNA2组、RNF2 siRNA3组,转染空载体组和未转染组分别命名为NC组和control组。RT-PCR和Western blot法观察食管癌ECA109细胞各组中RNF2表达变化。MTT法检测RNF2基因对ECA109增殖能力的影响。克隆形成实验检测RNF2对ECA109放射敏感度的影响。流式细胞术测定RNF2基因干扰后对细胞周期和凋亡分布的影响。结果 3对干扰序列组的RNF2基因在mRNA和蛋白表达水平低于control组和NC组,尤以siRNA1组效果最明显。选择siRNA1作为干扰组进行MTT和流式细胞术检测。MTT结果表明照射后干扰组细胞增殖明显受抑;克隆形成实验的结果显示干扰组的的D0、Dq、SF2显著低于control组和NC组,而干扰组的外推数N(extrapolation number N)值明显高于后者,可见干扰组细胞的放射敏感度高于control组和NC组;流式细胞术显示照射后RNF2 siRNA组G0/G1期明显高于control组和NC组,S期显著低于control组和NC组。结论 siRNA干扰技术有效地抑制了食管癌ECA109细胞中RNF2基因的表达,联合X线照射后显著抑制了细胞增殖,消除了细胞周期阻滞在S期,增加了食管癌的放射敏感度。

主 题 词：RNF2 RNA干扰 X线照射 放射敏感度 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3971/j.issn. 1000-8578.2016.10.002

馆 藏 号：203207876...