霍乱弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

作     者：李丹丹 徐义刚 邱索平 王昱 高会江 高慎阳 无

作者机构：海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海口570311 东北农业大学动物医学院哈尔滨150030 从化出入境检验检疫局广州从化510900 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心重庆404100 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牛遗传育种研究室北京100193 辽宁医学院畜牧兽医学院辽宁锦州121001 

基　　金：国家质检总局科技项目(2013IK031 2013IK051 2015IK089) 海南省社会发展科技专项(2015SF29) 海南省应用技术研究与开发专项(ZDXM20130025) 重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017) 广东检验检疫局科技计划项目(2013GDK04 2015GDK53) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 (Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第11期

页      码：106-108页

摘      要：为建立霍乱弧菌(VC)的快速检测方法,以VC的hlyA基因为靶基因设计合成引物及Taq Man探针建立实时荧光定量PCR快速检测法,同时对该方法进行了特异性、灵敏性、稳定性和重复性试验,并对145份临床样品进行了检测。结果表明:特异性试验中15株试验菌株荧光定量PCR检测只有VC菌株为阳性,表明该检测方法特异性强;灵敏性试验表明该方法的灵敏度为25 cfu/m L;稳定性和重复性试验表明同一样品重复检测4次,Ct值的变异系数均小于2%;对145份临床样品进行检测,共计检出2份VC阳性样品,与行标法(SN/T 2425—2010)检测结果一致。说明该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。

主 题 词：霍乱弧菌(VC) hlyA基因 实时荧光定量PCR 快速检测 检测方法的建立 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.20161027.002

馆 藏 号：203208315...