H7N9亚型禽流感病毒HRM检测方法的建立

作     者：刘志成 贾伟新 孙敏华 沈海燕 孙俊颖 殷三鸿 钟亮宁 张建峰 张春红 LIU Zhi-cheng JIA Wei-xin SUN Min-hua SHEN Hai-yan SUN Jun-ying YIN San-hong ZHONG Liang-ning ZHANG Jian-feng ZHANG Chun-hong

作者机构：广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省兽医公共卫生公共实验室广东广州510640 华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室广东广州510642 东莞市动物疫病预防控制中心广东东莞523086 

基　　金：国家科技部科研计划项目(YS2016YFNC020088 2014DFA31730) 广东省科技计划项目(2013B020224004 2015B0-50501007 2015B070701015 2014A040401048) 广东省农业厅专项项目(粤农函1046号) 广州市科技计划项目(201508020055) 东莞市科技计划项目(2014108101041) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2016年第46卷第11期

页      码：1388-1393页

摘      要：根据H 7N 9亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守区域,分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的H7N9亚型AIV检测方法。结果显示,该方法特异性强,其他常见禽源病毒及非H7亚型和非N9亚型的AIV不能形成特异熔解峰形;灵敏度高,对H7和N9阳性质粒的最低检测限分别达到1.0×101 copies/L和1.0×100 copies/L;重复性好,熔解峰Tm 1和Tm2的批内和批间变异系数均<1%;临床样本检测与某商品化H7N9亚型AIV定量PCR检测试剂盒比较,符合率为100%。该方法可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9亚型AIV的监测。

主 题 词：禽流感 H7N9 高分辨率熔解曲线 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.11.008

馆 藏 号：203208563...